Richard nasceu no dia 11 de Julho de 1959 em Perth Amboy, New Jersey, mas foi criado em Woodbridge uma cidade proxima.
Filho do italiano Adam C. Sambora e da polonesa Joan Sienila, Richie estudou na Woodbridge High School.
Começou a aprender a tocar guitarra aos 14 anos, logo após a morte de Jimi Hendrix em 1970. Desde o início sua maior influência foi o blues e o rock dos anos 60, tendo como principais influências Eric Clapton, Jimi Hendrix, Beatles, Jeff Beck, Andy Taylor, Stevie Ray Vaughan, Johnny Winter e Jimmy Page. Ele também teve influências da música clássica espanhola, de onde nasceu sua grande paixão pela guitarra espanhola.
Cursou faculdade de psicologia por dois anos, participava de festivais de bandas de garagem na universidade, e alternava os estudos com apresentações em clubes locais.
Antes de estourar no Bon Jovi, participiu de uma audição para tocar na banda Kiss, mas, por achar que a banda não se adquava a suas expectativas como músico, pois possuiam influências e generos diferentes, não assumiu o posto.
Desde seus 15 anos já participou de bandas como Rebel, The Mercy, Duque Willians & Extremes, The Massage (com Alec John Such), Richie Sambora & Friends, The Next, além de ter se apresentado junto a Joe Cocker.
Está no Bon Jovi desde 1983, quando assumiu o lugar de Dave Sabo. Assim como os os outros membros da banda, possui vários apelidos como "The King of Swing", "Mr. Bluesman", "Mr. Sambo", entre outros.
Multi-instrumentista, além da guitarra ele também toca violão, bandolim, baixo, bateria, saxofone, trompete, sítara, flauta, piano e acordeom.